Transport von Proteinen in Partikeln der Hydrophoben Interaktions Chromatographie

Ziel der Arbeit war die Charakteriserung des intrapartikulären
Proteintransports in der Hydrophoben Interaktionschromatographie (HIC) unter Variation charakteristischer Prozessbedingungen. Hierfür wurde ein teilweise automatisiertes, miniaturisiertes Screening-System mit einer zusätzlich auf Konfokaler Laser Raster Mikroskopie (CLSM) basierten Analysemethode für die Festphase etabliert. Die Klassifizierung der chromatographischen Systeme hinsichtlich optimaler Adsorptionsbedingungen erfolgte hinreichend basierend auf der indirekten Flüssigphasenanalyse. Der durch die direkte Analyse mit CLSM gemessene, intrapartikuläre Proteintransport konnte für qualifizierte Systeme mit einem Einzelpartikelmodell beschrieben werden, wodurch ein charakteristischer Parameter über die Packungsdichte der Proteine in verschiedenen Regionen der Adsorbenspartikel für jedes dieser Systeme erhalten wurde. Die CLSM Analyse liefert somit einen Prozessparameter mit potentiell direktem Bezug zu Proteineigenschaften und deren Veränderungen während des chromatographischen Trennvorgangs.