Les effets trypanocides des anticorps dirigés contre la tubuline recombinante de T.brucei

T. b. brucei alpha et beta tubuline gènes ont été exprimés dans E. coli en utilisant le plasmide d'expression pTrP2 et l'acide 3-beta-indoleacrylique comme inducteur. Les tubulines exprimées ont été analysées par SDS-PAGE et confirmées par Western blot, dans lequel elles avaient une masse moléculaire apparente identique de 50 kDa. Les tubulines exprimées ont été dissoutes individuellement dans de l'urée 8M et diluées 20 fois, après quoi elles ont été concentrées et largement dialysées contre du tampon MES. Après la dialyse, le rendement moyen de la tubuline alpha et bêta était de 0,7 g par litre de culture. Des anticorps polyclonaux ont été produits chez chacun des 56 lapins immunisés avec trois doses de tubulines concentrées à 150 µg ou 450 µg par immunisation et par animal. L'effet de ces anticorps sur T. b. brucei a été étudiée en cultivant T. b. brucei se forment dans jusqu'à 25% des antisérums élevés chez le lapin. Les antisérums des autres lapins n'ont pas inhibé T. b. brucei croissance en culture. Ces résultats montrent que les anticorps dirigés contre la tubuline trypanosomienne exprimée par des bactéries peuvent ne pas être cytotoxiques contre T. b. brucei.