Versuchsprotokoll: Histologische Anatomie (eBook)

Praktikumsbericht / -arbeit aus dem Jahr 2010 im Fachbereich Biologie - Humanbiologie, Note: 1, Philipps-Universität Marburg, Sprache: Deutsch, Abstract: Zur spezifischen Detektion und Lokalisation ausgewählter Proteine in der Gewebsprobe nutzt man in
der Immunhistochemie die natürliche Spezifität von Antikörpern. Dabei wird bspw. das Zielprotein
mit einem Primärantikörper markiert, bevor in einem zweiten Schritt ein konjugierter
Sekundärantikörper, der spezielle Eigenschaften zur Erkennung des Antigen-Antikörper-Kompelexes
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besitzt, diesen primären bindet. Die häufig, auch in diesem Praktikum, verwandte DAB (3,3’-
Diaminobenzidin) - Färbung ist eine enzymkatalysierte Methode, bei der das Biotin des biotinylierten
Sekundärantikörpers eine starke nicht kovalente Bindung mit dem Streptavidin des hinzuzugebenden
AB-Komplexes ausbildet. Dieser AB-Komplex besitzt neben dem Streptavidin (A) noch eine
biotinylierte Peroxidase (B), bei deren katalysierten Umsetzung von Wasserstoffperoxid zu Wasser
das lösliche DAB oxidiert wird und dadurch zu einem dunkelbräunlichen Produkt ausfällt, das unter
dem Mikroskop erkennbar ist. Durch diese sehr spezifischen immunhistochemischen Antigen-
Antikörper-Reaktionen ist eine mikroskopische Visualisierung einzelner Proteine im Schnitt möglich,
die zur Protein-Lokalisation und Differenzierung bestimmter Gewebskomponenten genutzt werden
kann.