Der Experimentator: Molekularbiologie / Genomics

Dr. Cornel Mülhardt. Geboren 1965. Biologie-Studium in Heidelberg und Hamburg. Wissenschaftl. Angestellter in Erlangen (Institut für Med. Biochemie). Seit 1998 tätig bei Hoffmann-La Roche (Basel) in der Forschungsrichtung Neurobiologie. Seit Mai 2001 Leiter der Biologielaboranten-Ausbildung.

1 Was ist denn 'Molekularbiologie', bitteschön? 1.1 Das Substrat der Molekularbiologie, oder: Molli-World für Anfänger 1.2 Was brauche ich zum Arbeiten? 1.3 Sicherheit im Labor 2 Einige grundlegenden Methoden 2.1 Nucleinsäure ist gleich Nucleinsäure und auch wieder nicht 2.2 Methoden zur DNA-Präparation 2.3 Die Reinigung von Nucleinsäuren 2.4 Konzentrieren von Nucleinsäuren 2.5 Konzentrationsbestimmung von Nucleinsäurelösungen 3 Das Werkzeug 3.1 Restriktionsenzyme 3.2 Gele 3.3 Blotten 4 Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 4.1 Die Standard-PCR 4.2 Neue Entwicklungen 4.3 Tipps zur Verbesserung der PCR 4.4 PCR-Anwendungen 5 RNA 5.1 Methoden der RNA-Isolierung 5.2 Methoden der mRNA-Isolierung 5.3 Reverse Transkription (cDNA-Synthese) 5.4 In-vitro-Transkription (RNA-Synthese) 5.5 Serial Analysis of Gene Expression (SAGE) 5.6 RNA-Interferenz (RNAi) 6 Die Klonierung von DNA-Fragmenten 6.1 Die Grundlagen des Klonierens 6.2 Mit welchen Vektoren klonieren? 6.3 Welche Bakterien? 6.4 Herstellen kompetenter Zellen und Transformation 6.5 Probleme beim Klonieren 6.6 Die Lagerung von Klonen 7 Wie man DNA aufspürt 7.1 Herstellung von Sonden 7.2 Hybridisierung 7.3 Nachweis der markierten DNA 7.4 Screenen von rekombinanten DNA-Banken 7.5 Two-hybrid system 7.6 Phage display 8 DNA-Analyse 8.1 Sequenzierung 8.2 Methoden zur Analyse von DNA auf Mutationen 9 Untersuchung der Funktion von DNA-Sequenzen 9.1 Untersuchung der Transkription in Geweben 9.2 Mutagenese 9.3 in-vitro-Translation 9.4 Expressionssysteme 9.5 Transgene Mäuse 9.6 Regulation der Transgenexpression 9.7 Gentherapie 9.8 Genomik 10 Tipps für die Karriereplanung, oder: Der ganz kleine Macchiavelli für Jungforscher 11 Zu guter Letzt 12 Anhang 12.1 NützlicheTabellen 12.2 Standardlösungen 12.3 Glossar 13 Wer, was, wo? 13.1 Lieferanten / Adressen 13.2 Literatur